質(zhì)粒載體，質(zhì)粒載體人工改造

質(zhì)粒(Plasmid)是一類天然存在于細(xì)菌和真菌細(xì)胞中能獨立于染色體DNA而自主復(fù)制的共價、閉合、環(huán)狀雙鏈DNA分子，也稱為ccDNA,其大小通常在1~600 kb內(nèi)。

載體（vector）一類能自我復(fù)制的DNA分子，其中的一段DNA被切除而不影響其復(fù)制，可用以置換或插入外源(目的) DNA而將目的DNA帶入宿主細(xì)胞。常用的載體有質(zhì)粒、噬菌體、病毒等。

質(zhì)粒載體是在天然質(zhì)粒的基礎(chǔ)上為適應(yīng)實驗室操作而進(jìn)行人工構(gòu)建的質(zhì)粒。與天然質(zhì)粒相比，質(zhì)粒載體通常帶有一個或一個以上的選擇性標(biāo)記基因（如抗生素抗性基因）和一個人工合成的含有多個限制性內(nèi)切酶識別位點的多克隆位點序列，并去掉了大部分非必需序列，使分子量盡可能減少，以便于基因工程操作。

質(zhì)粒構(gòu)建是分子生物學(xué)研究中較常用的實驗技術(shù)。原理依賴于限制性核酸內(nèi)切酶，DNA連接酶和其他修飾酶的作用，分別對目的基因和載體DNA進(jìn)行適當(dāng)切割和修飾后，將二者連接在一起，再導(dǎo)入宿主細(xì)胞，實現(xiàn)目的基因在宿主細(xì)胞內(nèi)的正確表達(dá)。